!!"全自動氮吹儀射線晶體分析也稱 "射線衍射分析(# $%& ’())$%*+(,-),此技術(shù)可以提供出蛋白質(zhì)分子中各原子非 常準(zhǔn)確的空間位置。 "射線光束照射到蛋白質(zhì)晶體上,部分光束向不同的方向發(fā)生散射。這些衍射的光 點(diǎn)在 "射線膠片上感光,得出衍射圖譜。蛋白質(zhì)分子中每個原子衍射出光波的振幅與其外周電子的數(shù)量 成正比,碳原子的振幅是氫原子的 .倍。每一原子都提供其各自的衍射波,這些衍射波的重組僅取決于原 子的排布。所以,衍射圖譜中光點(diǎn)的強(qiáng)度和光點(diǎn)的分布類型提供出蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的足夠信息。 /,0-12-3 ’$24對抹香鯨肌紅蛋白晶體進(jìn)行了 "射線衍射分析,其衍射圖中包含了 56 777個衍射光點(diǎn)。根據(jù)這些衍 射光點(diǎn)的密度與分布,通過計算機(jī)分析,繪出其三維電子云密度分布圖,進(jìn)而得出空間結(jié)構(gòu)圖形。 !!核磁共振光譜分析是揭示溶液中大分子的原子結(jié)構(gòu)的唯一技術(shù),其依據(jù)是大分子中某些原子核(如 氫離子)具有內(nèi)在磁性,即自旋的特性。通過改變外加磁場或電磁輻射(射頻)的強(qiáng)度,造成這些原子核頻 譜(或稱“振動”)的飄移。這種化學(xué)飄移(*028(*%9 :0()+:)可以檢測并記錄下來,經(jīng)分析得出蛋白質(zhì)的空間 結(jié)構(gòu)。 !!除了從以上的物理
學(xué)、物理化學(xué)等方法描繪蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)外,人們還試圖從已知一級結(jié)構(gòu)和空間 結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)其一級結(jié)構(gòu)與空間結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系,從中找出規(guī)律,來推測未知空間結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三 維結(jié)構(gòu)。 三、膠原蛋白的分子結(jié)構(gòu) !!根據(jù)蛋白質(zhì)的形狀,可將蛋白質(zhì)分為球狀蛋白質(zhì)和纖維狀蛋白質(zhì)。上述討論的是水溶性的球狀蛋白 質(zhì),它們具有催化、運(yùn)輸、調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝和調(diào)節(jié)基因表達(dá)等功能。纖維狀蛋白質(zhì)是高度延伸的長條形分子, 不易溶于水。人體內(nèi)的纖維狀蛋白質(zhì)主要有膠原蛋白(*,99%;2-)、!角蛋白(!<2$%+(-)、彈性蛋白( 56="" :3="">? @7>。膠原是結(jié)締組織的 主要蛋白成分,在一些組織中含量非常高(表 5A)。 表 ! "#某些組織中膠原蛋白的含量 (;BC77 ;干組織) 組! !織含! !量 骨(礦物質(zhì)除外) DDE 7 跟腱 D.E 7 皮膚 FCE G 角膜 .DE C 軟骨 A. ? .@ 韌帶 CFE 7 主動脈 C5 ? 5A 肝 @E G !!(一)膠原分子的氨基酸組成與一級結(jié)構(gòu)特點(diǎn) !!膠原分子又稱原膠原(+$,=,*,99%;2-),屬于糖蛋白。以皮膚中 !型膠原為例說明膠原
的氨基酸組成。 此型膠原富含甘氨酸(占總氨基酸組成的 @@>)、脯氨酸(C@>),以及脯氨酸和賴氨酸的羥化衍生物 A 羥脯氨酸(G>)和 6羥賴氨酸(7E .>)。羥脯氨酸僅發(fā)現(xiàn)于膠原分子。羥賴氨酸的 "羥基是膠原分子 中糖的結(jié)合部位。 第二章 !蛋!白!質(zhì)"! !!膠原分子的一級結(jié)構(gòu)有其特殊性。各類型膠原分子富含甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸,其氨基酸序列中 都有長段的由這 "個氨基酸組成的串聯(lián)重復(fù)序列,順序?yàn)楦矢? #或甘 $羥脯($和 #代表任意氨基 酸殘基)。!型膠原每條多肽鏈約含 % &&&個氨基酸殘基,此三肽復(fù)重順序可重復(fù)出現(xiàn) ’&&次以上。 !!(二)膠原分子的空間結(jié)構(gòu) !!膠原分子中每條多肽鏈的二級結(jié)構(gòu)是左 手螺旋。每 "個氨基酸螺旋上升一周。膠原 分子中富含的脯氨酸和羥脯氨酸雖然均不適 合形成球狀蛋白質(zhì)中常見的 !螺旋,但它們 側(cè)鏈的五元環(huán)卻迫使 )—*鍵形成有利于左 手螺旋的角度。 !!膠原分子是由三條多肽鏈組成的三螺旋 結(jié)構(gòu)。根據(jù)組成的不同,可將肽鏈分為 !%、 !’和 !"等 "種。 !型膠原由 ’條相同的 !%